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Contraste interférentiel de Nomarsky
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Vision des objects non opaques
Contraste interférentiel de Nomarsky
* Un condenseur spécial O.N. 0,90 avec révolver équipé d’anneaux de phase
* Quatre objectifs plans de phase 10 x / 0,25 Ph ; 20 x /0,40 Ph ; 40 x /0,65 Ph ; 100 x /1,25 Ph
* Une lunette de visée réglable
* Un filtre vert
Techniques de contraste
optique en microscopie
Les objets biologiques comme les cellules sont souvent
transparents et nécessitent une coloration pour en distinguer
les constituants. Diverses techniques permettent d'augmenter le
contraste des images sans intervention sur la préparation et
donc de permettre des observation sur le vivant. Il s'agit
essentiellement du contraste de phase inventé par Zernicke
en 1932 et du contraste interférentiel développé
par plusieurs auteurs dont Nomarski en 1952.
Dans le contraste de phase, au moyen d'une "plaque
de phase " dans l'objectif associée à un "anneau de
phase" sous le condenseur, les objets incolores, peu épais
(dits "de phase") sont rendus par des valeurs de gris
différenciées en fonction du déphasage qu'ils introduisent.
Différents type de plaques de phase existent: PositiveLow, PositiveLowLow, NegativeHigh, NegativeMedium. (cette page est liée
à l'essai d'un objectif NM acheté d'occasion)
En contraste interférentiel, un système optique dédouble
le faisceau avant la traversée de l'objet puis un système symétrique
recompose les deux faisceaux en les faisant interférer.
Voici des images de spermatozoïdes réalisées avec ces deux
techniques pour vous permettre d'en comparer le rendu.
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Contraste de phase négatif: |
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Contraste de phase positif
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Contraste de phase négatif:
(un objet plus
réfringent que le milieu apparait en blanc sur fond gris.
Je me suis procuré ce type d'objectif en occasion et il
correspond à un modèle plus ancien que mon microscope.
Je ne sais pas pour l'instant si la moindre qualité
vient de cela ou d'une mauvaise mise au point)
lisibilité moins bonne sur ce sujet de toute façon.
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Contraste interférentiel:
images sans halo,
avec une impression de relief
Cette technique est vraiment supérieure mais le matériel
en est beaucoup plus couteux.
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Le contraste interférentiel permet d'exploiter les objectifs
les plus forts. (100x)
Il est possible également de colorer le fond avec une couleur d'interférence
(ici bleu)
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Une autre technique , plus simple à mettre en oeuvre pour les
objectifs faibles du moins, est celle du "fond noir"
. Elle consiste à éclairer latéralement l'objet qui
apparait grace à la lumière qu'il diffuse. Il y a un fort contraste et les images sont spectaculaires mais il y
a moins de détails.
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